在ELISA檢測試劑盒中一般有兩次抗原抗體反應,即加標本和加酶結合物后。抗原抗體反應的完成需要有一定的溫度和時間,這一保溫過程稱為溫育。下面是2015新版ELISA試劑盒,您怎么看?
除有的ELISA試劑盒儀器附有特制的電熱塊外,一般均采用水浴,可將ELISA檢測試劑盒板置于水浴箱中,ELISA板底應貼著水面,使溫度迅速平衡。為避免蒸發,板上應加蓋,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,此時可讓反應板漂浮在水面上。
若用保溫箱,試劑盒應放在濕盒內,濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等,在盒底墊濕的紗布,zui后將ELISA試劑盒板放在濕紗布上。濕盒應先放在保溫箱中預溫至規定的溫度,特別是在氣溫較低的時候更應如此。ELISA檢測試劑盒屬固相免疫測定,抗原、抗體的結合只在固相表面上發生。ELISA試劑盒以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結合的機會,只有zui貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。
這是一個逐步平衡的過程,因此需經擴散才能達到反應的終點。無論是水浴還是濕盒溫育,反應板均不宜疊放,以保證各板的溫度都能迅速平衡。室溫溫育的反應,操作時的室溫應嚴格限制在規定的范圍內,標準室溫溫度是指20~25℃,但具體操作時可根據說明書的要求控制溫育。室溫溫育時,試劑盒只要平置于操作臺上即可。ELISA檢測試劑盒應注意溫育的溫度和時間應按規定力求準確。為保證這一點,在一個人操作時,一次不宜多于兩塊板同時測定。