為了保證ELISA試劑盒試驗的穩定及順利完成,下面通蔚生物給大家講解使用洗板機洗板時應注意以下三個步驟。
1、洗滌參數
主要的參數是洗滌量。自動洗板機會分配洗滌液。如果你之前遭遇過高背景,那么不要猶豫,將洗滌量調為高,比包被體積更高。太少的洗滌液會讓一部分分析表面洗滌不到,從而明顯增加背景。所有反應孔的洗滌量必須相同。
ELISA試劑盒的使用手冊中列出包被量。我們建議使用350µl洗滌液進行洗滌,以便清潔整個反應孔的壁。一般來說,洗滌量越高,則孵育步驟殘留的抗體或抗原量就越少。
2、抽 吸
還有一些參數會影響洗滌步驟的效果。這些參數包括吸液高度和吸入位置,這兩者都能調整,以降低背景(殘留量)和差異。
殘留液體中包含未結合的抗原或抗體,它們會增加背景信號。殘留量越小,殘留液體越少,轉移到下一步的干擾液體也就越少。
吸液高度會明顯影響殘留量;如果洗滌吸頭與反應孔底部的距離稍大,那就會讓殘留量急劇增加。反之,如果洗滌吸頭壓著反應孔底部,那么也會使吸液效率降低,殘留量增加。
3、洗滌次數
影響洗滌效果的主要參數是洗滌循環的量。當然,洗滌次數越多,背景越低。然而,太多次的洗滌會降低信號強度,使其難以測定。通常的做法是在每次抗體或抗原孵育后重復洗滌三次。不過,一般而言,包被平板需要的洗滌次數比用戶包被的平板要少。對于用戶包被的ELISA板,必須優化洗滌次數。
控制洗滌量和洗滌次數的另一種方法是加入過量的洗滌液。一般來說,96孔板的每個孔能容納330至460 µl。不過,有些自動化洗板機可設置程序,分配遠遠超出這個量的洗滌液,比如1 ml。它是如何做到的呢?其實很簡單,就是在分液的同時打開吸液功能。換句話說,隨著分液器分配更多的液體,抽吸器也將液體吸出。這種技術能增加洗滌量,但不會溢出到其他孔中。
以上是通蔚生物ELISA試劑盒試驗洗板機洗板的具體步驟有那些,希望可以幫助大家。上海通蔚生物倉鼠elisa試劑盒一路走來依靠豐富的經驗、優良的品質、充足的庫存、準確的交貨時間、競爭力的價格的優勢等獲得各大學院機構的支持和信任。我們在日后不論是銷售部門、技術部門還是行政部門都要不斷壯大,虛心學習,集思廣益,事無具細的為客戶所想,急客戶所急。讓客戶滿意,才是我們永恒的追求!