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細(xì)胞換液是指去除舊的培養(yǎng)基，換成新的培養(yǎng)基以繼續(xù)提供細(xì)胞充足的營(yíng)養(yǎng)支持。當(dāng)舊培養(yǎng)基 ph 值改變（含酚紅的培養(yǎng)基通常是變酸發(fā)黃）時(shí)，需要及時(shí)進(jìn)行換液。在培養(yǎng)細(xì)胞的過程中，換液是一項(xiàng)非常常規(guī)操作，它主要是為了清除細(xì)胞在生長(zhǎng)過程中產(chǎn)生的各種代謝廢物，補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞換液主要有全換液和半換液兩種方式，那么，不同方式的換液方法如何更換細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的溶液呢？

換液前工作準(zhǔn)備

環(huán)境準(zhǔn)備：相對(duì)密封、防塵、防菌的無菌室

操作者準(zhǔn)備：雙手清潔呈可操作狀態(tài)

物品準(zhǔn)備：超凈工作臺(tái)、CO2培養(yǎng)箱、裝有75%醫(yī)用消毒酒精的酒精噴壺、PBS緩沖液、含血清培養(yǎng)基、巴氏吸管、移液器、廢液缸。

工作準(zhǔn)備：預(yù)熱培養(yǎng)基，酒精棉擦拭培養(yǎng)基瓶外表面后移入生物安全柜/超凈工作臺(tái)。

細(xì)胞培養(yǎng)箱中取出的細(xì)胞，酒精棉擦拭培養(yǎng)瓶/皿外表面，移入生物安全柜/超凈工作臺(tái)。可以稍等待，待生物安全柜中的循環(huán)風(fēng)將試劑瓶和培養(yǎng)瓶的外表面吹拂幾分鐘后，擰開培養(yǎng)基瓶蓋虛掩，擰開培養(yǎng)瓶瓶蓋虛掩，培養(yǎng)皿蓋不用擰。

第一種方式：細(xì)胞全換液

如果是貼壁細(xì)胞，可以用全量換液法，直接吸去全部舊培養(yǎng)基，補(bǔ)充足量新鮮培養(yǎng)基。

細(xì)胞全換液具體步驟

1.將器材放入超凈臺(tái)，打開紫外照射滅菌，若是培養(yǎng)的細(xì)胞對(duì)溫度比較敏感，可以將含血清的培養(yǎng)基瓶放入37℃的水浴箱使得培養(yǎng)基溫度在37℃，再轉(zhuǎn)移到超凈臺(tái)紫外滅菌。另外，細(xì)胞培養(yǎng)間也需要紫外照射半小時(shí)左右。

2.從培養(yǎng)箱取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用酒精噴壺在瓶子表面噴灑75%酒精消毒，轉(zhuǎn)移到超凈臺(tái)，打開蓋子，輕輕吸出舊的培養(yǎng)液，可用移液器加入新鮮含血清培養(yǎng)基，注意一定不要從細(xì)胞貼壁面加入培養(yǎng)基，應(yīng)從側(cè)壁加，動(dòng)作輕柔，以免沖落細(xì)胞。

3.加好培養(yǎng)基后，蓋上蓋子，在瓶子上做標(biāo)記，注明換液時(shí)間，細(xì)胞種類，操作人員等信息。

4.放入培養(yǎng)箱之前應(yīng)再次用酒精噴一噴瓶子表面，然后應(yīng)記得整理操作臺(tái)，用酒精擦拭超凈臺(tái)臺(tái)面，清理廢液和垃圾。

第二種方式：細(xì)胞半換液

“細(xì)胞半換液"又稱“細(xì)胞半量換液"，即棄掉一半舊的培養(yǎng)基，再加一半新的進(jìn)去。選它的原因其實(shí)與前面不加PBS的理由有點(diǎn)相近。

半換液原因

1.給細(xì)胞提供適應(yīng)的緩沖環(huán)境；

2.細(xì)胞生長(zhǎng)過程中可能會(huì)分泌某些生長(zhǎng)因子，促進(jìn)生長(zhǎng)；

3.節(jié)省材料

4.方便操作：比如96孔板，換液很麻煩。所以常采用排槍進(jìn)行半換液；

5.對(duì)于懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)，有時(shí)也會(huì)選用半換液減低細(xì)胞密度；

以上是通蔚生物帶您了解細(xì)胞換液的方式有哪些，希望可以幫助到大家。上海通蔚生物科技有限公司以質(zhì)量求生存，細(xì)胞以信譽(yù)求發(fā)展的精神，精益求精，力求做到更好，不管是過去還是現(xiàn)在和將來，全體員工將再接再厲，以的服務(wù)態(tài)度，全新的精神面貌，為廣大新老客戶，提供的產(chǎn)品和售后服務(wù)，讓我們攜手共創(chuàng)美好未來！